BOLETÍN OFICIAL DEL ESTADO
Martes 9 de enero de 2024

Sec. III. Pág. 2996

Por su parte, los genotipos de olmo resistentes evaluados con esta metodología no
han mostrado ninguno de estos síntomas. En la presente fase del convenio se
propagarán mediante cultivo in vitro genotipos candidatos, localizados por el programa
del olmo en años previos, y genotipos confirmados como resistentes a la grafiosis, los
cuales servirán como control. Una vez las plántulas hayan formado la raíz, se inocularán
con O. novo-ulmi mediante la inmersión de la raíz en una suspensión esporal del
patógeno y se trasplantarán a recipientes estériles donde se crecerán durante 28 días,
tiempo en el cual se han obtenido los resultados más significativos en las comparaciones
entre genotipos resistentes y susceptibles durante la puesta a punto de la metodología.
Al término de este periodo, se evaluará el crecimiento, la aparición de raíces nuevas y de
síntomas asociados a la enfermedad, y se recogerá el material vegetal para realizar
distintos análisis bioquímicos indicadores de estrés asociados a la presencia del
patógeno. El número de genotipos a evaluar cada año dependerá del éxito del proceso
de propagación in vitro, aspecto muy variable y dependiente de cada genotipo. Se
espera poder ensayar al menos 20 genotipos candidatos, para cuya elección se tendrá
en cuenta su distribución geográfica. Se descartarán para el programa de mejora
aquellos genotipos que muestren caracteres asociados a resistencia media o baja a la
grafiosis. Así, el número final de genotipos a propagar y plantar en las parcelas de
experimentación se reducirá sensiblemente, con el consiguiente ahorro económico, de
tiempo y de espacio en el proceso de selección. Posteriormente, y una vez sean
evaluados por el método tradicional los genotipos seleccionados, se podrá estimar el
porcentaje de éxito de esta metodología de detección precoz.
2. Ampliación del catálogo de recursos genéticos de los olmos ibéricos:
construcción de un genoma de referencia de Ulmus minor e integración de los resultados
del programa de mejora.
En los últimos años se ha progresado en el estudio de las bases moleculares de la
resistencia de Ulmus minor a la grafiosis. El desarrollo de nuevas herramientas
moleculares, especialmente las basadas en las técnicas de secuenciación masiva, ha
permitido obtener una amplia información al respecto a nivel genético y transcripcional.
Pese a ello, y debido a la complejidad de estos estudios, no se conocen con precisión
todos los genes relacionados con la resistencia a la enfermedad, ni la implicación de
aquellos ya identificados como candidatos. En este sentido, la obtención de un genoma
de referencia de un ejemplar de olmo resistente permitiría avanzar en esta cuestión, al
facilitar la identificación de las regiones genómicas implicadas en la resistencia a la
enfermedad, lo que en el futuro simplificará la búsqueda de genotipos resistentes y el
análisis de los elementos genómicos responsables de la resistencia. Así mismo, la
obtención de un genoma de referencia permitirá incrementar las herramientas para los
estudios de diversidad y estructura genética poblacional, lo que supondrá un importante
avance para el programa de conservación y mejora de los olmos ibéricos.
En la presente fase del convenio se obtendrá un primer genoma de referencia de
Ulmus minor mediante la secuenciación de novo del clon resistente a la grafiosis
Ademuz (V-AD2), dado que es el genotipo con mayor difusión hasta la fecha, ha
mostrado una excelente adaptación a diferentes condiciones ambientales y una activa
respuesta molecular ante el patógeno. Esta actividad implica la secuenciación de
librerías de ADN, tanto de lectura larga como de lectura corta de mayor fiabilidad.
Mediante el uso de técnicas bioinformáticas se realizará el ensamblaje de las secuencias
obtenidas y con ello un primer borrador del genoma del genotipo seleccionado. A partir
de la información obtenida en anteriores trabajos realizados en el grupo de investigación
y de los futuros análisis este genoma se irá montando en sucesivas versiones mejoradas
hasta obtener un genoma ensamblado completamente.
Por otro lado, debido a la importancia que representan los clones de olmo
catalogados como resistentes en los planes de restauración de olmedas, tanto en
España como en otros países del continente europeo, se procederá a la resecuenciación
de seis de los siete genotipos catalogados en España (además del Ademuz, utilizado

cve: BOE-A-2024-506
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Núm. 8