BOLETÍN OFICIAL DEL ESTADO
Núm. 8

Martes 9 de enero de 2024

Sec. III. Pág. 2999

hipótesis de cómo han de variar estos parámetros en función de las condiciones
ambientales (humedad del suelo, radiación, temperatura y humedad relativa) y el coste de
producción de hojas, la cual establece que las plantas maximizarán su capacidad de
asimilación fotosintética sin alcanzar estrés hídrico significativo manteniendo una
homeostasis de ratio de 0,7 entre la concentración de CO2 intercelular de las hojas y
concentración de CO2 ambiental. Se seleccionarán 10 localidades con climas contrastados
donde se han plantado clones resistentes a la grafiosis en los últimos años (ya sea en
parcelas de ensayo, bancos de conservación o a través de donaciones a distintas
entidades). En cada uno de los ejemplares seleccionados se medirá una curva de
respuesta asimilación versus concentración intracelular de CO2, se medirá la capacidad de
transporte hídrico, la relación entre área foliar y área basal de los clones, se tomará una
muestra de hojas para evaluar su coste de producción y se tomará una muestra de suelo
para determinar su estructura y contenido en macronutrientes.
Incorporación de endófitos beneficiosos a la producción de planta.

En los últimos años se han seleccionado una serie de hongos endófitos que,
inoculados en plantas de olmo, han demostrado un efecto positivo en la resistencia de la
planta ante la grafiosis o en la supervivencia ante situaciones de estrés abiótico. En la
naturaleza, los endófitos se adquieren gradualmente por parte de la planta durante su
proceso de desarrollo, especialmente durante los estadios iniciales de crecimiento. Los
endófitos que están presentes en las semillas o en el suelo van a ser los primeros
colonizadores de la planta. Por otra parte, se conoce que el orden de llegada de estos
microorganismos a la planta puede influir en las asociaciones que se establezcan a largo
plazo debido a un «efecto de prioridad», pudiendo conducir a asociaciones de tipo
beneficioso o perjudicial. Una vez la planta adquiere un mayor desarrollo, la flora endófita
y las asociaciones que se establecen entre los distintos microorganismos son más
estables y resilientes ante cambios en su entorno, por lo que su modificación por métodos
artificiales resulta más compleja. En la presente fase del convenio se inocularán semillas y
plántulas jóvenes con endófitos beneficiosos para comprobar su influencia en el desarrollo
de las plantas y la persistencia de los endófitos inoculados a largo plazo en el interior de
sus tejidos. Esta utilización de los endófitos podría dar lugar a un mejor desarrollo de las
plantas, una mayor supervivencia o incluso a una mayor tolerancia al estrés biótico.
Para ello, durante el primer año, se recogerán semillas de polinización abierta de tres
individuos de Ulmus minor del banco clonal de conservación de Puerta de Hierro, las
cuales se tratarán mediante inmersión en una suspensión esporal de endófitos
clasificados como beneficiosos para la planta, bien sea por estimular su desarrollo o
incrementar la resistencia a la grafiosis. Asimismo, se tratarán plántulas de un genotipo de
U. minor obtenidas por cultivo in vitro mediante inmersión de su sistema radical en una
suspensión esporal de los mismos endófitos beneficiosos, seleccionados en fases previas
del convenio. Los genotipos seleccionados (tanto para la recogida de semillas como para
su propagación vegetativa) serán de resistencia moderada o baja a la grafiosis. Las
plántulas obtenidas (40 por árbol madre u ortet, en total 160 plantas) serán aviveradas
durante dos savias en un centro del Ministerio y plantadas al final de su segundo año de
vida en dos parcelas experimentales. Como controles, la mitad de los brinzales y réplicas
clonales obtenidos no se tratarán con los endófitos. Una vez establecidas las parcelas, se
medirá la tasa de crecimiento radial y apical y parámetros de intercambio gaseoso de las
plantas durante dos años. Cuando las plantas tengan cuatro savias, en cada parcela se
realizará uno de los siguientes ensayos: i) tolerancia a la sequía estival sometiendo a las
plantas de la parcela a carencia de riego durante los meses estivales, y ii) resistencia a la
grafiosis mediante la inoculación artificial del patógeno. Al cuarto año de edad se tomarán
muestras en árboles tratados y control para estudiar, mediante PCR cuantitativa, la
cantidad existente en los tejidos de floema y xilema de los endófitos inoculados. De esta
forma, se podrá evaluar la persistencia de los endófitos en la planta y su efecto sobre la
supervivencia, el desarrollo y la tolerancia al estrés biótico de las plantas.

cve: BOE-A-2024-506
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